DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE MÉTODOS ANALÍTICOS
O Processamento de Polímeros: Atividades, Equipamentos e Testes
O desenvolvimento e validação de métodos analíticos são etapas essenciais em diversas áreas científicas, incluindo química, farmacêutica, alimentos e meio ambiente. Esses processos garantem que os métodos utilizados para análise sejam confiáveis, reprodutíveis e adequados para o propósito pretendido. Sendo necessário a seleção de técnicas e condições experimentais apropriadas para quantificar ou identificar compostos de interesse em uma matriz específica. Essa etapa requer um conhecimento detalhado das propriedades físicas e químicas dos analitos e da matriz a ser analisada
Definição do Método
A primeira etapa é definir o objetivo do método, ou seja, o que se deseja medir e em que contexto ele será utilizado. Isso inclui determinar o tipo de análise (qualitativa ou quantitativa), os limites de detecção necessários e a matriz de amostra (água, solo, alimentos, medicamentos, entre outros).
Seleção da Técnica Analítica
A escolha da técnica analítica depende da natureza do analito e da matriz. Técnicas como cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), espectrometria de massas (MS), espectrofotometria UV-visível e cromatografia gasosa (GC) são frequentemente utilizadas. A decisão também leva em conta fatores como sensibilidade, seletividade, custo e disponibilidade de equipamentos.
Otimização do Método
A otimização é uma etapa crítica no desenvolvimento de métodos analíticos, pois busca melhorar o desempenho do método, equilibrando variáveis para alcançar máxima eficiência, sensibilidade e seletividade. Durante a otimização, parâmetros experimentais são ajustados para determinar as melhores condições analíticas. Existem diferentes abordagens para otimizar métodos analíticos, mas a mais utilizada é o Planejamento Experimental (DOE): Que utiliza técnicas estatísticas para avaliar simultaneamente múltiplos fatores e suas interações. Exemplos incluem o planejamento fatorial completo ou fracionado e métodos de superfície de resposta (RSM). Essa abordagem economiza tempo e fornece maior entendimento do sistema.
Os critérios usados para avaliar o sucesso da otimização incluem:
Tempo de análise reduzido
Melhor resolução entre picos
Maior sensibilidade (relação sinal/ruído)
Menor uso de solventes e reagentes, promovendo sustentabilidade
A otimização não apenas melhora o desempenho do método, mas também reduz custos e torna a análise mais eficiente.
Validação do Método Analítico
Após o desenvolvimento, o método precisa ser validado para assegurar sua adequação ao propósito pretendido. A validação segue diretrizes internacionais, como as publicadas pelo International Council for Harmonisation (ICH) e pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), entre outras. Os parâmetros mais comuns avaliados durante a validação incluem:
Especificidade/Seletividade
A especificidade avalia a capacidade do método de distinguir o analito de interesse de outros componentes presentes na amostra, como interferentes ou produtos de degradação.
Linearidade
A linearidade é a capacidade do método de fornecer resultados diretamente proporcionais à concentração do analito em um intervalo específico. Para avaliar a linearidade, prepara-se uma curva de calibração de cinco a sete concentrações diferentes do analito.
Limite de Detecção (LOD) e Limite de Quantificação (LOQ)
O LOD é a menor quantidade do analito que pode ser detectada, mas não necessariamente quantificada. Já o LOQ é a menor quantidade que pode ser quantificada com precisão e exatidão aceitáveis.
Precisão
A precisão avalia a repetibilidade e reprodutibilidade do método, medindo a variação entre os resultados obtidos em condições semelhantes. É subdividida em:
REPETIBILIDADE
Análise em curto prazo, sob as mesmas condições operacionais.
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA
Variação entre analistas, equipamentos ou dias diferentes.
RECUPERAÇÃO
Mede o grau de concordância entre o valor medido e o valor verdadeiro ou aceito como referência. Isso é avaliado pela análise de amostras contendo concentrações conhecidas do analito, como materiais de referência certificados.
Estabilidade das Amostras e Padrões
É essencial garantir que as amostras e padrões analíticos permaneçam estáveis durante todo o processo de análise. Testes de estabilidade incluem condições de armazenamento e transporte.
Documentação, Relatórios e produção científica
Todo o processo de desenvolvimento, otimização e validação é documentado em relatórios detalhados. Esses documentos são essenciais para auditorias, revisões regulatórias e uso futuro do método. Além de produção de patentes, trabalhos de conclusão de curso, dissertações, tese e artigos que são importantes para destacar a relevância do desenvolvimento analítico no laboratório.
Conclusão
O desenvolvimento e validação de métodos analíticos são fundamentais para garantir análises confiáveis e reprodutíveis, assegurando a qualidade em diversas áreas científicas. Desde a definição dos objetivos até a validação final, cada etapa — como a escolha da técnica, a otimização e a avaliação de parâmetros como precisão, linearidade e especificidade — contribui para a obtenção de métodos robustos e adequados ao propósito. Além de promover eficiência e sustentabilidade, esses processos também geram conhecimentos valiosos, documentados em relatórios e publicações, que fortalecem a ciência e a inovação tecnológica.
